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Expression von TNF-alpha und IL-6 im otosklerotischen Gewebe
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Veröffentlicht: | 24. April 2006 |
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Die Otosklerose ist eine Knochendysplasie des menschlichen Felsenbeins, deren Entstehung wohl von einer persistierenden Masernvirusinfektion auf einem genetischem Hintergrund getriggert wird. Grundlegende morphologische Untersuchungen hatten im Otoskleroseherd Entzündungszellen sowie Immunglobuline gezeigt. Vor kurzem wurde eine Coexpression von TNF-alpha und Masernvirus-RNA in otosklerotischen Stapesfragmenten mittels RT-PCR detektiert, eine Lokalisation gelang bisher nicht. In der vorliegenden Studie untersuchten wir immunhostochemisch Fußplattenfragmente von Patienten mit klinischer Otosklerose auf die Expression der Entzündungsmediatoren TNF-alpha und IL-6. Paraffin-eingebettete Serienschnitte wurden in verschiedenen Aufschlusspuffern entparaffiniert. Nach dem Blocken der endogenen Peroxidase mit 3%-gen H2O2 wurden die Proben mit den ersten Antikörpern anti-TNF-alpha (Chemicon), anti-IL-6 (Chemicon) inkubiert. Als Sekundär Antikörper wurden biotinylierte anti-mouse IgG bzw anti rabbit IgG verwendet. Das gebundene Biotin wurde mit Avidin-Biotin-Komplex detektiert und als Gegenfärbung wurden die Zellen mit Methylgrün gefärbt. Lungengewebe bzw. Haut wurden als Positivkontrollen in der Etablierung der Experimente verwendet. Im otosklerotischen Gewebe zeigte sich eine deutliche Reaktion gegen TNF-alpha und IL-6, wohingegen das Kontrollgewebe (Gehörgangsknochenfragmente) stets negativ blieben. Dieses Ergebnis untermauert die Ansicht, daß bei der Otosklerose eine chronische Entzündung vorliegt. TNF-alpha und IL-6 werden von aktivierten Makrophagen, B- und T-Zellen sezerniert und ist ein wichtiger paracriner Mediator für die Stimulation der Osteoklastenproliferation, die in der Resorptionsphase eine wesentliche Rolle spielen.
Unterstützt durch DFG NI 524/2-1.